Vi gjør også PCR-eksperimenter, hvorfor er resultatene alltid så mye dårligere enn andre?

Vi gjør også PCR-eksperimenter, hvorfor er resultatene alltid så mye dårligere enn andre?

I laboratoriet, se på andres PCR, forsterkningseffektiviteten er høy, elektroforese stripen perfekt, og se på sine egne, vanskelig å gjøre i lang tid, føler reaksjonen er veldig bra, resultatet av en falsk positiv test …… Hva er problemet?

Jeg tror at mange av våre partnere også har møtt forskjellige problemer. Når vi støter på en vegg i PCR-eksperimenter, vil vi ubevisst analysere faktorene i reaksjonssystemet, men vi ignorerer ofte den viktige innflytelsen til forbruksvarer i eksperimenter.

PCR-resultatet ditt er feil, PCR-forbruksartiklene kan være den viktigste grunnen. På den ene siden vil mikroforurensning av forbruksvarer eller innføring av hemmere forårsake eksperimentell forurensning; På den annen side vil feil utvalg av forbruksvarer også få eksperimentelle resultater til å lide.

Problemet kommer igjen. Det er mange typer PCR-forbruksvarer, så hvordan velger du de rette for å gjøre eksperimentet jevnere? Hva er problemene man må ta hensyn til? Ikke bekymre deg, i dagI kombinert med mange års erfaring med å sortere ut vanlige problemer med PCR-forbruksvarer, håper jeg å hjelpe deg.

 

Q1: Hvorfor er PCR-forbruksvarer vanligvis laget av PP-materiale?

Huida: Fordi PCR-forsyninger vanligvis er i direkte kontakt med reagenser eller prøver, er polypropylenmaterialer (PP) biologisk inerte, holder seg ikke til biomolekylære stoffer og har god kjemisk toleranse og temperaturtoleranse (kan autoklappes ved 121 ° C, tåler også temperaturendringer i løpet av den termiske syklusen).

 

Q2: Hvordan skal jeg velge mellom forskjellige størrelser på PCR-rør / -plater?

HUIDA: Formål med valg: velg de riktige produktene i henhold til de spesifikke eksperimentelle kravene. Det meste av størrelsen på PCR-røret kan oppfylle kravene til PCR-reaksjon. På dette grunnlag anbefales det å velge rør med lite volum først. Fordi reaksjonsrøret / -platen med lite volum har et lite overliggende rom, forbedres varmeledningsevnen og fordampningen reduseres. Samtidig er det nødvendig å unngå å legge til for mange eller for lite prøver. For mye kan føre til redusert termisk ledningsevne, søl og krysskontaminering, mens for lite kan føre til tap av fordampning av prøven.

Spesifikasjoner og volumer av vanlige reaksjonsrør:

Enkelt / kombinert rør: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96-brønns plate: 0,2 ml, 0,15 ml

384-brønners plate: 0,04 ml

 

Q3: Når prøvemengden er liten, vil jeg velge enkeltrør eller kombinasjonsrør, men hvorfor har noen flatt deksel og andre har konveks deksel?

Huida: Når prøvemengden er liten, foretrekkes enkeltrøret eller det kombinerte røret. Imidlertid, når reaksjonsvolumet er stort, er enkeltrøret dominerende, og volumet kan nå 0,5 ml. Og flat deksel og konveks deksel har hver fordel, spesifikk kan referere til følgende informasjon.

Enkelt rør: 0,2 ml og 0,5 ml; Kan velge utvalgsmengde fleksibelt.

Tilkoblingsrør: 0,2 ml eller 0,15 ml er valgfritt; 8 eller 12 rør er vanlige.

Flatt deksel: kan gi nøyaktig fluorescenssignaltransmisjon for qPCR; Lett å skrive merker.

Konveks deksel: kontakt med det varme dekselet til PCR-instrumentet for å redusere deformasjonen av reaksjonsrøret forårsaket av trykk; Imidlertid vil det påvirke fluorescens signaloverføring og kan ikke brukes på qPCR eksperimentet.

 

Q4: Hvorfor har noen PCR-plater skjørt og andre ikke?

Huida: Faktisk er skjørtet på PCR-platen designet for å bedre tilpasse seg automatiseringsapplikasjoner, og gir stabil støtte og mekanisk utholdenhet for instrumentet, samt høyere stabilitet under pipetteringsprosessen.

PCR-plater er vanligvis delt inn i ikke-hemline, halv-hemline og full-hemline.

Uten Plate: Passer for de fleste PCR-maskiner eller qPCR-maskiner, men ikke for automatiseringsapplikasjoner. Stabiliteten er ikke høy i pipetteringsprosessen, så den må brukes med platestøtte.

Halvskjørt kantplate: kan tilpasses etikett- eller strekkodeapplikasjon, og automatisk påføring, og har god pipetteringsstabilitet.

Full skjørtkantplate: veldig egnet for automatiserte eksperimentelle applikasjoner, kan også tilpasses merkingen og påføringen av strekkode. Den har god mekanisk styrke, kan brukes i utbulingsmodul PCR-instrument, og har høy stabilitet i prosessen med pipettering.

 

Q5 :For PCR-plater, hvorfor er hjørnene og etikettene ikke helt like?

Huida: Det avhenger av effekten av hjørneskjæringen og merkingen.

Hjørnesnitt: Valget av hjørnesnittposisjon på PCR-plate avhenger av kravene til det passende instrumentet for enkel plassering.

Identifikasjon: Alfanumeriske markører på PCR-plater hjelper til med å identifisere individuelle brønner og prøveplasser. Vanligvis for den pregede, digitale logoen eller den graverte logoen. For noen automatiserte applikasjoner er trykte og merkede reaksjonsplater forseglet bedre.

 

Q6: Hvorfor er noen PCR-plater konvekse mens andre er flate? Som er bedre?

Huida: Det som passer best er best. Det er to typer vanlige PCR-plater: flat poremargin og høy poremargin.

Flatt hulls reaksjonsplate, egnet for de fleste PCR-apparater.

Reaksjonsplater med stigende åpningskanter letter membrantetting og reduserer risikoen for krysskontaminering mellom prøvene.

 

Huida har mange års erfaring i produksjon og prosessering av PCR-produkter og industriens høye standarder. Produktlinjen er rik og kan møte de aller fleste eksperimentelle PCR-applikasjoner. Kom og velg de riktige produktene for dine eksperimentelle applikasjoner.

谷歌推广疫情产品PCR


Innleggstid: Jun-03-2021